Lokalisierungsmikroskopie und Flussratenkontrolle für Multiplexing   

Wie Fluigent die Lokalisierungsmikroskopie unterstützt  

Der Aufbau eines mikrofluidischen Multiplexsystems für die sequentielle Markierung erfordert Fachwissen in den Bereichen mikrofluidisches Flüssigkeitsmanagement, Elektronik und Software, was einen hohen Bedarf an technischen Ressourcen, Zeit und Geld erfordert.  

Abhängig von den physikalischen Parametern des Systems müssen die verschiedenen technologischen Komponenten wie die Flüssigkeitszufuhr, mikrofluidische Ventile, Elektronik und andere Geräte, passend zusammengestellt werden. Außerdem ist für eine automatisierte Flusskontrolle unsere Software erforderlich. 

1- Fluigent hat kundenspezifische On-Demand-Multiplexing-Systeme und OEM-Automatisierungs-Workflows für die Lokalisierungsmikroskopie und die Bildgebung lebender Zellen entwickelt.   

Diese Entwicklungen stehen Ihnen als modulare Bausteine zur Verfügung. 

2- Verbessertes Flüssigkeitsmanagement durch Fluigents patentierte druckbasierte Flusskontrolle 

Hohe Stabilität zur Gewährleistung der Lebensfähigkeit der Proben   

Unsere Geräte sind mit der druckbasierten Flusssteuerungstechnologie von Fluigent ausgestattet. Mithilfe der druckgesteuerten Durchflussregelung wird die Probe gleichmäßig in ein mikrofluidisches System injiziert. Da es keine mechanischen Teile gibt, die mit den Flüssigkeiten in Berührung kommen, können Druckregler pulslose Flüsse erzeugen, die mit peristaltischen Pumpen oder sogar der genauesten Spritzenpumpe nicht erreicht werden können. Mit Fluigent-Druckreglern wird eine Druckstabilität von < 0,1 % CV erreicht. Dies ermöglicht ein neues Maß an Stabilität, das für neue Anwendungen erforderlich ist.  Die nachstehenden Diagramme zeigen Perfusionsvergleiche zwischen Fluigent-Reglern und Schlauch- und Spritzenpumpen.   

Der Benutzer kann die Flussrate, das Volumen und den Zeitpunkt der Abgabe jeder Lösung unabhängig voneinander wählen. Anschließend führt das System das Protokoll selbstständig aus und kann für langfristige Prozesse stabil bleiben.    

Durchflussratenmerkmale für Mikroskopie Anwendungen    

Durch den Einbau eines Ein-Aus-Ventils in das Gerät wird sichergestellt, dass der Fluss gestoppt wird, wenn der Benutzer die Bildgebung anordnet. Wie die nebenstehende Grafik zeigt, wird bei Verwendung der Cut-Flow-Technologie die Flussrate sofort gestoppt, wenn das gewünschte Volumen injiziert wurde, wodurch Rückflüsse verhindert werden. 

Durch die Verhinderung des Rückflusses während der Inkubationsschritte kann das mikrofluidische sequenzielle Injektionssystem schnell zwischen Injektions- und Inkubationsschritten wechseln, was für Mikroskopiestudien von Vorteil ist. Ein weiteres Ventil am Ausgang kurz vor dem Chip oder der Kammer ermöglicht es, den Fluss entweder dorthin oder in den Abfall zu leiten, um die Schläuche zwischen zwei aufeinanderfolgenden Injektionen zu spülen. Dieses Ventil ist auch für die automatische Kalibrierung und das Priming nützlich.

3- Hohe Multiplexing-Fähigkeiten durch interne Integration und Automatisierung mikrofluidischer Ventile   

Um unseren Mikroskopieanwendern Multiplexing-Fähigkeiten zu bieten, haben wir automatisierte sequenzielle Injektionssysteme entwickelt, die auf der Integration und Automatisierung mehrerer mikrofluidischer Ventile (z. B. 11-Port/10-Wege-Drehventil, 3/2-Wege-Ventile) basieren. Sie werden von maßgeschneiderter Elektronik begleitet, die den Anschluss und die Wartung erleichtert, sowie von mechanischer Integration, die Risiken wie Luftblasenbildung minimiert und die Ergonomie verbessert. Sie alle werden von unserem Algorithmus gesteuert, um mit unseren Durchflussregelungskomponenten auf die effizienteste und leistungsfähigste Weise zusammenzuarbeiten, und werden in eine Anlage integriert, um ein vollautomatisches System zu erhalten.   

Mit solchen Systemen können mehrere Pufferreservoirs während eines experimentellen Arbeitsablaufs ausgetauscht werden, was das Multiplexing vieler Markierungen in einem Experiment ermöglicht. Dies macht sie optimal für Lokalisierungsmikroskopie-Anwendungen. 

4 SDK und Software für Zeiteinsparung, Benutzerfreundlichkeit und nahtlose OEM-Integration   

Fluigent hat Softwarefunktionen speziell für Multiplexing-Anwendungen entwickelt, die es dem Benutzer ermöglichen, Liquid-Handling-Sequenzen für den Einsatz in der Mikroskopie vollständig zu automatisieren. Das Perfusionsgerät kann automatisch jedes Perfusionsprotokoll durchführen und bietet folgende Vorteile : 

• Anpassung an jeden Versuchsplan für eine genaue und reproduzierbare Vorbereitung der Proben für die Fluoreszenzmikroskopie   
• Intuitiv, zeitsparend und einfach zu bedienen: Individuelle Methoden können schnell erstellt, gespeichert und für einen Lauf abgerufen werden.   
• Ermöglicht Langzeit-Perfusionsstudien wie z. B. Multicolor-PAINT-Imaging   

Die Funktionen umfassen:   

• Flussmanagementfunktionen: Volumeninjektion, zeitgesteuerte Injektion, Reservoirauswahl, Flüssigkeitsspülung usw.   
• Sequenzierungsfunktionen: Warten, Warten auf Benutzer, Warten auf TTL, Gruppe, Schleife   
• Funktionen zum Laden und Speichern von Protokollen   
• Datenaufzeichnungsfunktion   
• TTL- und TCP/IP-Funktionen  
•  Kommunikation mit externen Systemen und Warten auf deren Signale als Teil der Protokolle, um andere Bildgebungsprozesse durchzuführen, während das Perfusionsprotokoll pausiert wird   
• Fehlerfunktionen (Rückmeldung über Fehler, die während des Protokolls auftreten)   

Die Standardsoftware ist in unserem automatisierten sequenziellen Injektionssystem, Aria, für Endanwender enthalten. Die Aria-Software fasst alle oben genannten Funktionen zusammen und bietet eine benutzerfreundliche Schnittstelle, die es dem Benutzer ermöglicht, Funktionen hinzuzufügen, um ein vollständiges Fluidikprotokoll zu erstellen.