Long-term perfusion studies
Aria连续灌注系统
[OAR]Automated system for sequential perfusion experiments
Fluigent introduces Aria, our automated solution for cellular perfusion or timed injection protocols. Aria allows one to automate delivery up to 10 different solutions into a chamber or microfluidic chip by following user defined protocols.
- Automation
- Biocompatible
Contamination-free
- Save time
Automated protocols
- Easy to use
All in one instrument and software
- Adaptable
Fits any experimental design
产品特点
输送液体多达10种
Aria适用于任何应用,可在几天内注射40µL到数百毫升不等的药物。相继使用不同的溶液时,可清洁管道以尽量减少交叉污染。用户可使用Aria的智能软件了解每种溶液的输送时间。该软件还可通知用户每个储液瓶运行方案所需的最小容量
自动化任何协议
Aria自带直观的软件,只需点击几下即可设计协议。操作人员均可为其方案的每一步设置培养时间、流速、分液体积等参数。记录下来的方案可在用户之间共享。记录每个实验的流速和压力
减少可变性
操作人员使用移液管的内在差异和人员之间的差异分别为5.1%和8.1%,与这两组数据相比,Aria将实验之间的差异大大减少至0.5%。
保持样本的完整性
无污染:样本在实验开始时输送,实验过程中不被触摸,从而最大限度地降低手动操作的污染风险。与传统移液的方法相比,受控、平稳的流动可更好保存样本。
成像研究的理想选择
Aria可以通过使用TTL信号与各种显微镜同步。Aria可以发送和接收TTL信号,例如启动成像周期,或在成像周期完成时恢复Aria方案。Aria的软件带有暗调模式,可在成像室中工作。Aria还配有LED灯,便于在暗区域使用
相关应用
为什么选择Aria?
DNA杂交、高分辨率空间转录组学、DNA绘制或组织剖面等应用需要高分辨率显微镜,因为这些针对的都是细胞内的纳米结构。
对于每一种应用,样本都要与特定的探针连续培养,以便与细胞内的目标结合。换针前,需要执行一系列的清洗步骤,然后移除前一次使用探针,这样就可以避免因连续用针带来的污染。
与传统免疫标记相比,该技术的优势在于每个样本的靶标数量不限于显微镜的四种传统颜色,因为DNA可以很容易地从靶标上分离,而像抗体那样在结合时仍然牢固附着。
减少实验误差
在显微镜上手动将溶液从洗涤缓冲液更换为探针会带来一些挑战:
- 轻触移液管头端,即可改变培养皿的位置并记录其位置
- 移液过程中,样本会被冲走
- 样本可能会被污染
- 液体可能会溢出到显微镜上
- 由于步骤数而导致溶液次序错误
此外,连续更换溶液的时间可能会很长(一次实验最多4-5天),很繁琐,而且需要研究员在场。
自动化方案
Aria是唯一一款能够将多达10种不同溶液自动输送至流动吸收池的仪器。它融手动移液优势和一体化系统功能于一体,专用于一种特定应用,还集成了显微镜、特定芯片类型和一套特定的解决方案。任何有多种溶液输送的方案都可以自动化,与手工操作相比,这既节省了研究员的时间,又减少了实验之间的变异性。
- Aria简单易用。无需专门培训,也不会像自制系统那样需要时间排除故障或需要手动加液。
- 与完全集成的系统相比,Aria提供了灵活性,因为完全集成的系统受制于一种芯片类型和一套特定应用的解决方案。Aria可以在一个实验室中实现不同应用的自动化,因为它可与任何芯片和任何类型的试剂兼容。此外,用户还可在显微镜之间轻松移动Aria。
- 总而言之,Aria不仅经济而且高效,可作为替代一体化系统的一种方案。作为进行调查和设置所有参数的完美选择,Aria可全面优化成像方案。
“我在与Fluigent合作的研究项目中测试了Aria注射系统。更准确地说,通过使用Aria注射系统,我可以在非常精确和可控的流速下实现乳腺癌细胞捕获过程和免疫染色的自动化。软件界面很好用,可实时跟踪实验的进展。更厉害的部分是,ARIA甚至还可以计算出每个步骤所需的总时间,避免了设置前的等待时间! 这极大地方便我进行实验。”
Emile Lakis / 居里(Curie)研究所,IPGG / 巴黎
选择最符合您需求的版本
单一输出版本
非常适合高质量的多重成像实验。
Aria融手动移液优势和一体化系统功能于一体,专用于一种特定应用,还集成了显微镜、特定芯片类型和一套特定的解决方案。任何有多种溶液输送的方案都可以自动化,与手工操作相比,这既节省了研究员的时间,又减少了实验之间的变异性。
串行输出版本(最多可灌注9个样本)
完美的台式工作站,可实现染色或任何具有多种流体输送的常规方案的自动化。
Aria致力于帮助客户实现方案完全自动化,提高生产力、可靠性,减少手动操作和节省时间。Aria是市场上唯一可与任何灌注室兼容的工作站。
产品规格
产品性能
流速控制 | 水的流速范围为40 µL/min至1 mL/min |
流速压力控制 | 最大为2 bar |
阀门 | 十位开关阀-两位开关阀(2) |
储液瓶(8) | 15mL标准液,2mL备用 |
冲洗液储液瓶 (2) | 100 mL |
管子 | FEP,外径为1/16英寸,内径为250µm |
浸润表面 | 聚丙烯、FEP、玻璃、PEEK |
压缩空气源 | 需要非腐蚀性的压缩空气(实验室管线、气 瓶、压缩机或Fluigent FLPG) |
电脑规格 | Windows 7或更高版本 |
硬件规格
尺寸 | 382 mm x 240 mm x 265 mm |
重量 | 9 kg |
电气规格
电压 | 24V DC |
化学相容性
气体相容性 | 干燥无油气体、空气、任何非腐蚀性或非爆炸性气体 |
液体相容性 | 仅水溶液 |
Aria软件
实时控制、方案自动化、数据记录和导出 |
片段 1
如何插入Aria
片段 2
连接以设置流体路径
片段 3
如何给储液瓶加液
片段 4
如何手动操作Aria
片段 5
使用Aria执行校准
片段 6
就地控制Aria
片段 7
软件演示
为了节省时间并尽可能减少试剂消耗,Aria在其内部和外部管道中连续灌入溶液以注入芯片。
工作原理:
如果方案要求注入40µL溶液A,培养1小时,注入50µL溶液B,培养1小时,然后用缓冲液冲洗5分钟,总体积为300µL的管子(内部+外部),Aria将按如下方式预充管子:
因此,有必要校准管子长度和相关体积。
下面描述了在Aria中优化方案编写的所有可用功能
校准
校准是自动进行的,用户可用软件确定其升压的总体积(内部体积+L1+L2)。记录校准值,以备将来进行实验。
预充
最初,Aria内的所有管道都是干的。建议将“预充”功能作为第一步,以便在不向芯片或腔室注入空气时将所有溶液装入Aria。如果用户手动执行灌装,则可以禁用此功能。Fluigent强烈建议使用这一功能。
灌注/注射
灌注可以按注射量(如:第1步)或持续时间(如:第2步)来设定。
用户选择要注射溶液的储液瓶(例如:储液瓶1),设置溶液进入流动吸收池的流速(例如: 100 µL/min)和注射的体积(例如:100 µL)或持续时间( 例如:1分钟)。流速范围为40µL/min至1 mL/min。软件会自动计算出溶液进入流动吸收池的时间。
培养/等待
通过在“等待”功能中输入培养时间(例如:1.5小时),可以轻松设置培养时间。
“等待用户”功能是“等待”功能的变体。如果用户必须执行手动操作,如注射前准备细胞,则此功能尤其有用。收到用户通知进行下一步的命令前,系统会一直等待。在没有用户通知的情况下,系统会在12小时后进行下一步。
清洁管子
为了防止连续进样之间的交叉污染,可以使用“冲洗管”功能用缓冲液清洗管子。用户选择含有清洗溶液的储液瓶(例如:储液瓶10)和冲洗管的流速(例如:100µL/min)。
Aria将L1管中残留的所有剩余液体排入废液,并用清洗液灌入L1管。L1残留的缓冲液也会排入废液。此操作不导致液体流向芯片,因为残留液和缓冲液都不会进入芯片。但是,不会清除L2中的残留液体。鉴于此,Fluigent公司建议用户尽量缩短L2的长度。
外部同步
Aria配有TTL信号,可以发送和接收外部TTL信号。
- 发送TTL
每个步骤的两侧都有两个铃():在设置的前面和后面(参见下面的“体积注射步骤”)。
点击任意一个铃,两个铃即可同时激活 ()然后,Aria将在步骤开始(如下示例)或结束或分别在这两个步骤发生时发送一个TTL信号。
Fluigent公司建议使用此功能来同步灌注和成像。
- 接收TTL信号
接收外部TTL信号前,“等待TTL”功能会将Aria置于暂停状态,从而继续方案接下来的步骤。如果Aria没有收到任何信号,它就会在12小时后自动进行下一步。
最小容积储液瓶
Aria旨在最大限度地减少试剂消耗。需要增加少量的液体 (36µL) 来预充系统,并确保注射后储液瓶中仍然存在一些残留液体,以防止空气进入系统。
用户编写方案时,软件会计算出每个储液瓶中成功运行方案所需的最小容量。
编写、加载、保存序列
单击以设计新的序列。
运行序列前,软件会自动要求用户保存序列。可以访问所有保存的序列,并通过单击加载。
用户可以通过单击保存的数据随时保存序列。
记录数据
对于每个实验,Aria都会自动记录并保存如下相关数据:流速、压力以及储液瓶中溶液是被输送到芯片还是排入废液中。点击即可访问所有数据
Expertise & resources
出版物
Radtke, AJ,等人。 IBEX: an iterative immunolabeling and chemical bleaching method for high-content imaging of diverse tissues. Nature Protocols (2022) doi: 10.1038/s41596-021-00644-9
<https://www.nature.com/articles/s41596-021-00644-9>
Huang, K.等人。 A Novel Method to Map Small RNAs with High Resolution. Bio-protocol (2021) doi: 10.21769/BioProtoc.4128.
<https://bio-protocol.org/e4128?p=51&way=207>
媒体
Radtke, AJ,等人。 IBEX: An open and extensible method for high content multiplex imaging of diverse tissues, Presented at CZI HCA network and HuBMAP consortium
<https://drive.google.com/file/d/1QkJSvtH2oAUFrssg-Sp7jp5XQQysuDP9/view>
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